如何检测脑膜炎奈瑟氏菌：[6]

一、脑膜炎奈瑟氏菌 脑膜炎奈瑟氏菌（学名Neisseria meningitidis），又名脑膜炎双球菌或脑脊髓膜炎双球菌，是一种革兰氏阴性菌，主要寄居在人体鼻咽部，可通过飞沫传播。人感染脑膜炎奈瑟氏菌将引起败血症或流行性脑脊髓膜炎（简称流脑）。（1）败血症：该菌自鼻咽部侵入，进入血循环致人体发病。其释放内毒素引起皮肤瘀点、瘀斑为局部施瓦茨曼反应，激活补体，血清炎症介质明显增加，较其他革兰阴性菌强5-10倍，也较其他内毒素更易激活凝血系统，因此在休克早期便出现弥散性血管内凝血，及继发性纤溶亢进，进一步加重微循环障碍、出血和休克，最终造成多器官功能衰竭。（2）行性脑脊髓膜炎：该细菌侵犯脑膜，进入脑脊液，释放内毒素等引起脑膜和脊髓膜化脓性炎症及颅内压升高，出现惊厥、昏迷等症状。严重脑水肿时形成脑疝，可迅速致死。二、脑膜炎奈瑟氏菌检测方法1.直接涂片检查（1）瘀血斑：刺破瘀斑血印片，或血膜片，干燥固定后革兰染色阴性双球菌，呈肾形成对排列，可初诊。（2）脑脊液：取脑脊液离心后沉淀物涂片，干燥固定后革兰染色，若发现中性粒细胞内或胞外革兰阴性双球菌，呈肾形成对排列，结合临床可确诊。2.细菌培养法将标本葡萄糖肉汤增菌培养液，直接接种于血琼脂平板、巧克力琼脂平板，置于5%-10%CO2环境中，35℃培养18-24小时后可见圆形、灰褐色、湿润、光滑、边缘整齐、直径1-2mm的小菌落，经涂片证实为革兰阴性双球菌，并进一步根据相应的生化反应等试验予以鉴定。3.生化鉴定主要通过氧化酶、糖类发酵以及培养生长特点进行。①细菌形态呈肾形；②氧化酶试验阳性；③触酶试验阳性；④分解葡萄糖、麦芽糖产酸不产气；⑤荚膜多糖抗原直接凝集试验。4.血清凝集法根据荚膜多糖可将脑膜炎奈瑟氏菌分为A、B、C、D、X、Y、Z、29E、W135、L、H、I、K等13个血清群，其中A、B、C群最为多见，约占90%。关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐生产的脑膜炎奈瑟氏菌全套诊断血清产品。这套产品除了包含脑膜炎奈瑟氏菌菌10个常见血清群的诊断血清。5.核酸扩增法核酸扩增技术，即聚合酶链式反应（polymerase chainreaction，PCR），其基本原理是设计、合成两条寡核苷酸，作为引物，对应于待测病原微生物某一段特异性序列的两端，然后在体外模拟DNA体内复制的过程反复扩增，使靶序列放大上万倍甚至上百万倍而被检测出来。