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即用型肿瘤细胞冻存液操作步骤

即用型肿瘤细胞冻存液,所含化学成分明确,无动物源性成分,可一步实现细胞冻存并长期在-80℃冰箱保存,保护细胞免受冰晶和溶质损伤,适用于大多数常规细胞。能有效地提高常规肿瘤细胞复苏后存活率与活力。产品质量 稳定可靠,使用方便,助力科研工作者摆脱程序繁琐、操作复杂、容易污染的传统冻存方法,专注于后续实验研究。产品优点1、省去繁琐的降温步骤,可直接放置于-80°C 冰箱,节省时间和精力。2、即用型,无需现配,操作方便,可减少实验中因操作引起的污染。3、在多种哺乳细胞系中经过性能验证,其复苏率和活率达90%以上。4、可长期存储于-80°C 冰箱(5年以上),取用方便。5、采用成分明确的无血清配方,价格比常规自配细胞冻存液更为低廉。
工具/原料
1

LiveCyte LC-1601 肿瘤细胞冻存液

2

冻存管

3

肿瘤细胞

4

细胞培养液

5

离心机

6

离心管

7

液氮罐或-80度冰箱

8

水浴

9

培养瓶或培养皿

10

37℃孵箱

方法/步骤
1

培养皿或培养瓶中细胞按常规方法消化,或分离获得肿瘤细胞后,收集于离心管中。

2

使用离心机离心,去除上清,收集细胞沉淀。

3

根据细胞生长密度加入适量的细胞冻存液进行重悬,充分混匀(推荐冻存密度为 1-2x10的6/ml)。

4

将细胞悬液分装至冻存管中,直接放置于-80°C 冰箱保存。24 小时后可移入液氮长期保存(可选)。

5

细胞复苏流程如下:从-80°C 冰箱或液氮罐中取出细胞。

7

在冻存管中加入少量完全培养基,再将细胞混合液移入含有该细胞完全培养基的离心管中,样品和培养基比例为1:10,然后轻轻吹打,混合均匀。

8

离心后去除上清,收集细胞沉淀。

9

轻轻弹松细胞沉淀,加入适量培养液后接种于培养瓶或培养皿中,轻轻晃动使细胞分布均匀,置于37℃孵箱中培养。

注意事项
1

使用LiveCyte冻存液之前放在四度冰箱预冷,在常温条件下放置的时间不宜过长,以免影响冻存效率。

2

如需对原代细胞及干细胞进行冻存,最好采用LC-1602冻存液系列。

3

由于本产品含有部分DMSO 成分,针对部分DMSO 敏感的细胞,建议在正式使用前对细胞进行为期一周的试验性检验。

4

本产品仅用于科研用途,不可用于治疗、诊断、家庭等其他用途。

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