转速可以达到13，000 rpm的传统台式离心机
乙醇，β-巯基乙醇
第一次使用前请先在漂洗液RW瓶和70%乙醇瓶中加入指定量无水乙醇!使用前将10X红细胞裂解液RLB用DEPC处理水稀释到1X。操作前在裂解液RLT中加入β-巯基乙醇至终浓度1%，如1 ml RLT 中加入10μl β-巯基乙醇。此裂解液最好现用现配。配好的RLT 4℃可放置一个月。在适合大小的RNase free离心管中加入1体积（<1.5 ml）加入各种抗凝剂新鲜血液 (颠倒混匀后)和3体积的红细胞裂解液RLB，颠倒混匀，可轻弹管壁,确保混匀。
室温放置10分钟（期间应该颠倒轻弹混匀数次帮助裂解红细胞）。 如果RNA降解严重，可在冰上裂解，但是时间可长一些以充分裂解。
12,000 rpm离心20秒，倒弃红色上清，并小心的尽可能多的吸弃上清（注意不要吸到管底的细胞团），留下完整的管底白细胞团。 离心后在管底应该见到白色的白细胞团，也可能有一些红细胞残片和白细胞团在 一起，但是如果看到的是大部分的红色细胞团，说明红细胞裂解很不充分，应该再加入红细胞裂解液重悬细胞团后重复步骤2，3。 上清尽可能的吸弃，残留过多会稀释裂解液，造成裂解结合异常，产量纯度降低。
涡旋或者轻弹管壁将白细胞沉淀完全松散重悬，加入350μl（<0.5 ml全血）或者600μl（0.5-1.5ml全血）裂解液RLT，吹打混匀后用手剧烈振荡20秒，充分裂解。病人正常血样白细胞数量为4000-7000/μl，如果血样中白细胞数量可能大幅增加，应该适当减少处理量。或者按照350μl（<2x106白细胞）或者600μl（2x106-1x107白细胞）比例加RTL。
用吸头吹打混匀帮助裂解或者剧烈涡旋震荡直到得到满意匀浆结果(或者电动匀浆30秒)，可以剪切DNA，降低粘稠度和提高产量。
较精确估计裂解物体积，加入等体积的70%乙醇（请先检查是否已加入无水乙醇!）,此时可能出现沉淀，但是不影响提取过程，立即吹打混匀，不要离心。
立刻将混合物(每次小于700μl，多可以分两次加入)加入一个吸附柱RA中，（吸附柱放入收集管中）13,000 rpm离心60秒，弃掉废液。
加700μl 去蛋白液RW1，室温放置1分钟，12，000rpm 离心30秒，弃掉废液。
加入500μl漂洗液RW（请先检查是否已加入无水乙醇!），12,000 rpm 离心30秒，弃掉废液。加入500μl漂洗液RW，重复一遍。
将吸附柱RA放回空收集管中，13,000 rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液, 以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
取出吸附柱RA，放入一个RNase free离心管中，根据预期RNA产量在吸附膜的中间部位加30-50μl RNase free water（事先在 70-80℃水浴中加热效果更好）， 室温放置1分钟，12,000 rpm 离心1分钟。
如果提取全血>0.5 ml或者>2x106白细胞，加30-50μl RNase free water重复步骤11，可以得到更多的RNA，或者使用第一次的洗脱液加回到吸附柱重复步骤一遍(如果需要RNA浓度高)。洗脱两遍的RNA洗脱液浓度高，分两次洗脱后如果合并洗脱液的RNA产量比前者高15–30%，但是浓度要低，用户根据需要选择。
关于DNA 的微量残留：一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,EASYspin系列RNA提取产品，由于采取了独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留影响不是很大，如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR，我们建议在进行模板和引物的选择时：(1) 选用跨内含子的引物，以穿过mRNA中的连接区，这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。或者选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。缩短延伸时间，使DNA来源模板无法参与扩增反应。(2) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。在步骤去蛋白液RW1漂洗前，直接在吸附柱RA上进行DNase I处理
附录1：DNA酶柱上消化（详细请参考RN34 DNase I 柱上消化试剂盒说明书)1. 按照前面所列RN06试剂盒操作步骤操作，直到做完操作步骤7。2. 取45μl DNase I buffer和5μl RNase free DNase I在离心管轻轻吹打混匀成工作液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。3. 向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1，12,000 rpm 离心30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。试剂盒来源：昊鑫生 物。4. 向吸附柱RA 中央加入50μl的DNase I 工作液，室温（20℃-30℃）放置15 分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上向膜四周浸润充分和膜接触，不要让工作液滴在O型垫圈或是离心柱管壁上挂壁或者挂在垫圈上不能充分和膜接触。5. 向吸附柱RA 中加入350μl去蛋白液RW1， 12,000 rpm 离心30-60 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。接操作步骤9完成后续步骤。
所有的溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。
不合适的储存于低温（4℃或者－20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃－25℃）进行。
避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。