吸附柱和收集管，裂解液，析出液
洗涤液， 洗脱液 ，消化液
1. 请自行准备：无水乙醇、生理盐水、1.5mL离心管。2. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。c) 配制好的析出液及洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
1. 样本处理：a) 拭子：向1.5mL离心管中加入800μL生理盐水，将拭子收集的样本置于生理盐水中，涮洗20秒，使细胞完全脱落，贴离心管壁挤干拭子上的液体，12,000 rpm 离心5 min，弃700 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀15秒。 b) 痰液：向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH，室温放置30分钟，每10分钟振荡混匀一次，12,000 rpm离心5 min，弃上清，加入0.5mL生理盐水，混匀，12,000 rpm离心5 min，弃400 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀15秒。2. 加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。
1. 加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。2. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。3. 将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4℃离心1 min，弃收集管内废液。5分钟振荡混匀一次，12,000 rpm离心5 min，弃上清，加入0.5mL生理盐水，混匀，12,000 rpm离心5 min，弃400 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀15秒。2. 加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56℃水浴10 分钟。
1. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4℃离心2 min，离去残留的洗涤液。2、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm 4℃ 离心2 min，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。
1、 析出液、洗涤液含有刺激性化学物质，操作过程请做好防护措施，避免直接接触皮肤，防止吸入口鼻。如不慎沾染皮肤或眼睛，请立即用清水或生理盐水冲洗，必要时请就医。
2、 裂解液如有白色絮状物析出属正常现象，置于37℃水浴中溶解即可。