多能干细胞是从内细胞团分离出来，具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。可为细胞遗传操作和分化研究提供丰富的实验材料。改方法采用埃泽思生物人多能干细胞培养基（AC-1001000/AC-1001001）进行细胞培养与传代。
工具/原料
1
人多能干细胞培养基（Applied Cell™: Cat. no.AC-1001000）
2
即用型基质胶（Applied Cell™: Cat. no.AC-1001007）
3
人多能干细胞消化液（Applied Cell™: Cat. no.AC-1001008）
4
Serum-Free干细胞冻存液（Applied Cell™: Cat. no.AC-1001011/1001012）
方法/步骤
1
基质胶包被培养板
2
解冻：将从液氮中取出的冻存管快速浸入37℃温水中，快速摇动，使其在1~2min内快速解冻；
3
离心将其逐滴加入含有干细胞培养基的15mL离心管中，1000rpm离心3min；
4
重悬：离心后弃上清加1mL人多能干细胞培养基对干细胞沉淀进行吹吸混匀。
5
接种：吹吸均匀后，将已经平衡好的即用型基质胶弃掉，将吹打均匀的干细胞悬液加入到已经包被好的6孔板中，并补全每孔2mL培养体系。
6
培养：水平十字轻轻晃动6孔板使细胞均匀分布。并置于37℃，5% CO2的恒温培养箱培养，第2天观察细胞贴壁情况；
7
换液：从复苏的时间开始每24h换液一次。
注意事项
以上步骤应在无菌条件下操作
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