首先，取0.1~0.2g新鲜植物叶片于液复中研成粉末，或加人0.5m.提取缓冲液研磨成匀浆。将粉末或匀浆转移至2mL 离心管中，加人1.5ml.提取缓冲液，加提取缓冲液研磨的样品补加该溶液至1.5mL 即可，剧烈振荡,4*C 12000r/m n 离心10min.
然后，去上清，加人800UL 65C预热的裂解缓冲液，用牙签搅动沉淀使其完全悬浮于裂解缓冲液中，65C水浴30min,期间不断轻轻摇动。于上述溶液中加人等体积的氯仿:异戊醇溶液，轻轻颠倒混勺，需戴于套，防止损伤皮肤，至有机相变为深绿色或黑色，室温下静置10~20min,12000r/min 离心10min。
然后，将上清转人另一离心管中，加入等体积的氯仿:异戊醇溶液，轻轻颠倒混匀,直至溶液混匀为相。将上清转人另一离心管中，加入2/3体积预冷(一20C)的异丙醇，轻轻颠倒混匀,这时会产生絮状沉淀。如无明显的沉淀生成，可在低温(一20'C)延长放置时间，沉淀量会增加。
其次，用玻棒勾出沉淀(如不能勾出，可通过离心获得沉淀)，用75%的乙醇洗涤沉淀2~3次(洗脱盐分和杂质),直至乙醇清澈。将上述沉淀于室温风干(不宜过干，否则很难溶解)，加入1mL ddH2O,再加入10pg/uLRNA 酶3~5pL,于37C消化30min。
其次，于上述溶液中加入等体积的氯仿:异戊醇溶液，轻轻颠倒混匀10~20min,12000r/min离心10min。重复2 次。
其次，取上清，加入1/10 体积预冷的3mol!/L 乙酸钠(NaAc)和2 倍体积预冷的无水乙醇，轻轻颠倒混匀，可见白色絮状沉淀。如不是絮状沉淀，可在12000r/min 离心10min。
最后，去上清，用75%的乙醇洗涤沉淀3~5 次，12000r/min 离心10min条件下，将沉淀风干，溶于适量的TE或ddH2O 中，储于一20C备用。
上述解决方法为小编所提供，希望能够帮到大家。