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农杆菌侵染烟草

转基因植物培育方法。以重组质粒转入农杆菌,然后用农杆菌侵染烟草叶片,从而获得目的转基因烟草。
工具/原料
1

无菌苗,重组质粒,农杆菌,共培养基,ms0等

2

酒精灯,镊子,剪刀

方法/步骤
1

将重组质粒转入农杆菌,然后将农杆菌扩大培养,获取OD约为0.8的菌液。

2

将菌液移入离心管,离心,获得菌体。去上清,用MS0清洗3边,最后用MS0重悬,测OD,控制在0.4左右。

3

重悬液中加入20mg/ml AS

4

将烟草叶片去边缘和主脉,剪成均匀大小。放入农杆菌中侵染约8min

5

晾干,然后放入共培养基中黑暗培育三天,转入S1约三周,再转入S2约2周,转入S3中让小苗生根即可。

注意事项
1

全过程为无菌操作。

2

注意周围杂菌污染。

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