转基因植物培育方法。以重组质粒转入农杆菌,然后用农杆菌侵染烟草叶片,从而获得目的转基因烟草。
工具/原料
1
无菌苗,重组质粒,农杆菌,共培养基,ms0等
2
酒精灯,镊子,剪刀
方法/步骤
1
将重组质粒转入农杆菌,然后将农杆菌扩大培养,获取OD约为0.8的菌液。
2
将菌液移入离心管,离心,获得菌体。去上清,用MS0清洗3边,最后用MS0重悬,测OD,控制在0.4左右。
3
重悬液中加入20mg/ml AS
4
将烟草叶片去边缘和主脉,剪成均匀大小。放入农杆菌中侵染约8min
5
晾干,然后放入共培养基中黑暗培育三天,转入S1约三周,再转入S2约2周,转入S3中让小苗生根即可。
注意事项
1
全过程为无菌操作。
2
注意周围杂菌污染。