流式细胞仪(FCM)是八十年代集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等高技术发展起来的一种先进仪器，已广泛应用于免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。
【方法与操作】
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（1）制备活性高的细胞悬液(培养细胞系、外周血单个核细胞、胸腺细胞、脾细胞等均可用于本法)。
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（2）用10％FCS RPMI1640调整细胞浓度为5×10６～１×10７／ml。
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（3）取40μl细胞悬液加入预先有特异性McAb(5～50μl)的小玻璃管或塑料离心管，再加50μl 1∶20(用DPBS稀释)灭活正常兔血清，4℃ 30min。用洗涤液洗涤2次，每次加洗涤液2ml左右，1000rpm×5min。
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（5）加适量固定液(如为FCM制备标本，一般加入1ml固定液，如制片后在荧光显微镜下观察，视细胞浓度加入100～500μl固定液)。
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（6）FCM检测或制片后荧光显微镜下观察(标本在试管中可保存5～7天)。
注意事项
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（1）整个操作在4℃下进行，洗涤液中加有比常规防腐剂量高10倍的NaN３，上述实验条件是防止一抗结合细胞膜抗原后发生交联、脱落。
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（2）洗涤要充分，以避免游离抗体封闭二抗与细胞膜上一抗相结合，出现假阴性。
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（3）加适量正常兔血清可封闭某些细胞表面免疫球蛋白Fc受体，降低和防止非特异性染色。
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（4）细胞活性要好，否则易发生非特异性荧光染色。
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