在进行细胞的培养过程之中,培养基的组成必然有血清,而且血清的好坏,无菌程度决定着实验的成功关键,决定着细胞培养成功的关键,那么血清灭活的无菌操作步骤和注意事项有哪些呢?
工具/原料
1
细胞
2
血清
方法/步骤
1
选一个和血清瓶子一样的瓶子作为对照的瓶子,把对照瓶内倒入和血清等体积的蒸馏水。作为温度的测量。
2
温度的调节,在对照组的瓶子里插入两个水银温度计,放在水浴箱,在温度计显示56度时候,调节校准水浴箱的温度56度。
3
将血清瓶和对照瓶一起放入水浴箱,温度调到56度,水浴半小时,灭活之后分瓶装,做无菌实验,在-70—-20度下保存。
4
要观察冰冻血清的颜色和透亮度,颜色偏红或者颜色偏浅有沉淀表示血清质量不好,因此要选择质量好的血清灭活。
5
血清的使用要避免多次的反复解冻,会增加血清被污染的概率和降低血清的质量,一但反复解冻的血清出现沉淀那么表示血清不可用或者质量极差。
6
为了保证实验的结果的稳定,保证血清分瓶时候要摇匀,然后分瓶,尽量使用同一血清保证统一变量的原则。
注意事项
血清尽量减少使用反复解冻的血清
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