GPX可以利用GSH催化过氧化氢及许多有机过氧化物,产生水和有机醇。
工具/原料
1
1 样品匀浆液:(可用50mM pH=7.8的PBS替代) 2检测液:(可以用25mM pH=7.0的PBS替代) 3 20mM NADPH:5mg-300μL(-70℃保存,4℃可保存一天)
2
4 84mM GSH:14mg-550μL(可适当分装,-20℃保存) 5 30mM过氧化物试剂(t-Bu-OOH):4.3μL-1mL(现用现配) 6 GR:2U
方法/步骤
1
酶液的提取:1 取0.2g叶片加入3mL(2+1)匀浆液和少量石英砂研磨,再将匀浆液转移至50mL离心管中
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2 配平后,15000g 4℃ 离心15min。上清即为酶液,待测定。检测液一直处于37℃预热状态,加样顺序依次,去离子水做空白。
注意事项
检测液需要一直处于37℃预热状态
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