细胞凋亡（Apoptosis）是为了维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。细胞凋亡是一个的主动过程，它涉及一系列基因的激活、表达以及调控等的作用，而不是病理条件下，自体损伤的一种现象，主要是为了更好地适应生存环境而主动争取的一种死亡过程。
工具/原料
1
Annexin V -FITC Apoptosis Dection kit,1X PBS,细胞，0.25%胰酶，2.0mL离心管，4℃冷冻离心机
2
微型台式真空泵，流式细胞仪
1.细胞处理：
1
将6孔板中的培养基收集到2.0mL的离心管中，每孔加1.0mLPBS洗涤细胞，再加200ul的胰酶进行消化，具体时间视情况而定。
2.细胞染色：
1
用冷的PBS洗2次，然后用1X的结合液重悬细胞（1*10^6cells/mL），一般结合液加入体积500-800mL。
2
将100ul细胞悬液（1*10^5cells）转移至1.5ML离心管中。
3
加5uL的FITC AnnexinV和5ul的PI。
4
轻轻涡旋细胞且避光，常温25℃的条件下孵育15min。
5
每管加400ul的1X结合液。
3.流式分析
1
提前15min，打开流式细胞仪进行清洗；
2
进行样品测定区域的选择，并用正常的细胞进行调整电压，并进行设门。
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开始测定样品，待测定完成后，进行分析，并进行保存，最后清洗仪器，待仪器清洗完成后关闭软件，最后关闭仪器。
注意事项
1
Annexin V检测细胞早期凋亡，将Annexin V进行绿色荧光（FITC或EGFP）标记；
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PI检测凋亡中晚期的细胞和坏死细胞，可透过细胞膜而使细胞核染红。
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Annexin V与PI匹配使用，可以将处于不同凋亡时期的细胞进行区分。
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