背景技术葡萄糖酸锌在临床上除了用于治疗缺锌引起的生长发育迟缓、营养不良、厌食症等,还可用来治疗口腔溃疡、胃溃疡、尘肺、普通感冒,提高机体免疫力,促进智力发育等。
公开号为CN 1 A和CN 1 A的中国发明专利公开了采用离子交换色谱配备电导检测器测定葡萄糖酸的方法,其分别采用离子交换色谱配备电导检测器测定和离子交换色谱配备电化学检测器测定。
上述方法中离子交换色谱法受淋洗液水质影响较高,要求用二次去离子的超纯水才能准确测定。采用梯度淋洗条件复杂,检测时间长。
为了解决现有检测方法复杂、检测时间长的技术问题,提供一种方法简单、检测时间短的葡萄糖酸的检测方法。本文所提供的葡萄糖酸的检测方法,其包括如下步骤:
(1)系统适应性:称取葡萄糖酸锌对照品,加水溶解并制成每1ml中含葡萄糖酸0.84mg的溶液,取20ul注入液相色谱仪,记录色谱图,葡萄糖酸峰与相邻辅料峰的分离度应大于1.5,连续进样5次,所得葡萄糖酸峰面积的相对标准偏差不超过2.0%;
(2)取葡萄糖酸锌对照品,精密称定,分别加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含葡萄糖酸0.67mg、0.84mg和1.01mg的溶液作为对照品溶液;取葡萄糖酸锌颗粒,精密称定,加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含葡萄糖酸0.84mg的溶液,作为供试品溶液;
(3)量取所述三种对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,以对照品溶液浓度的对数值对相应的峰面积的对数值计算线性回归方程,相关系数不小于0.99;另取供试品溶液,同法测定,用线性回归方程计算。
根据蒸发光散射检测器的原理,样品浓度和检测器响应之间呈指数关系,经对数转换后可呈线性。因线性方程的截距不为零,含量测定宜采用随行标曲法,根据线性方程,可获得准确的结果。
1、葡萄糖酸锌颗粒中葡萄糖酸的含量测定1.1仪器与试药Agielnt 1200高效液相色谱仪(配备蒸发光散射检测器);METTLER XP205电子天平葡萄糖酸锌颗粒葡萄糖酸锌对照品
1.2系统适用性称取葡萄糖酸锌对照品适量,加水溶解并制成每1ml中约含葡萄糖酸0.84mg的溶液,取20ul注入液相色谱仪,记录色谱图,葡萄糖酸峰与相邻辅料峰的分离度应符合要求,连续进样5次,所得葡萄糖酸峰面积的相对标准偏差不得过2.0%。
1.3对照品溶液配制分取称取葡萄糖酸锌对照品21.49mg,26.66mg和31.88mg,加水溶解并定量稀释至25ml,摇匀,作为对照品溶液(1)、(2)、(3)。
1.4供试品溶液配制分别称取葡萄糖酸锌颗粒1.4019g和1.4145g,加水溶解并稀释至10ml,摇匀作为供试品溶液。
1.5色谱条件色谱柱:Venusil HILIC蒸发光散射检测器(参考条件:漂移管温度:110℃,载气流速:2.0L/min,增益:8)流动相:0.05%的甲酸水溶液-甲醇(60:40)流速:1.0ml/min柱温:30℃进样量:20ul
1.6样品检测精密量取上述三种对照品溶液各20μl,分别注入液相色谱仪,记录色谱图,以对照品溶液浓度的对数值对相应的峰面积的对数值计算线性回归方程,相关系数(r)应不小于0.99;同法测定供试品溶液,用线性回归方程计算供试品中葡萄糖酸的含量。
1.7实验结果对照品线性方程为y=2.143x+4.2872,R2为0.9996。测得的葡萄糖酸锌颗粒中葡萄糖酸的含量分别为99.58%和99.92%。检测图谱见图1-图4