猪瘟病毒检测方法

复合反转录一套式聚合酶链式反应，根据GenBank上登录的现有CSFV基因组全序列，选择高度保守区设计了一对CSFV通用引物，并在该对引物跨越区域的内部设计了猪瘟兔化弱毒疫苗和强毒特异性引物，建立了-种能区分鍺瘟强毒和弱毒的RT-nPCR鉴别诊断方法。

胶体金免疫层析试纸条法，该诊断方法具有快速简便、无需仪器、结果准确等优点。其原理是利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细层析作用，使抗原抗体在固相膜上反应，由胶体金标记的抗体显色，阳性反应在膜上呈现红色，  阴性反应则不显色。已经报道的CSF胶体金诊断技术，  主要基于CSFV抗体定量检测和病原定性检测，对猪感染CSFV野毒或接种免疫弱毒疫苗不能进行鉴别诊断。根据CSFV野毒和弱毒核酸序列差异建立的套式PCR技术和荧光定量PCR技术，能区分CSFV野毒和弱毒株，但主要用于实验室诊断，不适用于现地检测。

直接法，它通过标记抗体直接与相应抗原（待检抗原标本）结合，来鉴定。间接法，用已知未标记的抗体（第一抗体）与待检抗原反应或用未知抗体与已知抗原反应，反应一定时间后，洗去未结合的抗体，再与标记的抗免疫球蛋白抗体（二抗）反应。双标记法是用两种荧光素（常用FITC和PE）分别标记特异性不同的抗体，用于检测同一标本中的不同抗原。此法常用于细胞表面抗原和受体的研究。

病毒分离培养与鉴定方法病毒必须在活细胞内才能增殖，故要用活细胞或组织来培养。采用的方法有动物接种、鸡胚培养和细胞培养三种，观察结果为阴性，还是阳性。

酶联免疫吸附试验酶分子与抗体或抗抗体分子共价结合，滴加底物溶液后，底物可在酶作用下使其所含的供氢体由无色的还原型变成有色的氧化型，出现颜色反应。因此，可通过底物的颜色反应来判定有无相应的免疫反应，从而检测相应的病毒。