XTT是MTT的衍生物，是一种黄色的四氮唑盐。当XTT与电子偶合剂吩嗪硫酸甲酯联合应用时，黄色XTT可以被细胞内的线粒体脱氢酶还原成水溶性的橙黄色甲臢产物，在450nm有最大吸收峰。这种水溶性的橙黄色甲臢产物与活细胞数成正比。
工具/原料
XTT试剂 96孔板 酶标仪 细胞 细胞培养箱等
方法/步骤
1
收集对数期细胞，调整细胞悬液浓度，96孔板每孔加入100ul，调节细胞密度为每孔1个。
2
5%CO2，37℃孵育过夜，代贴壁后，加药。
3
配置不同浓度的药物，每个浓度药物设3个复孔。
4
每孔给药100ul，5%CO2，37℃培养，根据试验设置不同的孵育时间，倒置显微镜下观察。
5
XTT与电子偶联剂按50：1进行配置，混匀后，每个孔加50ul，5%CO2，37℃培养4h。
6
酶标仪测量OD值。
7
计算细胞增殖抑制率。
注意事项
1
XTT用60℃预热培养液配制成6.6mmol/L，过滤除菌，现配现用。
2
吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)用PBS配制成220mmol/L，4℃避光保存20天
3
XTT与PMS按1：1混合(临用时混合)。
上一篇：老厨师教你做银耳红枣汤
下一篇：怎么做木耳核桃红枣露