一 实验试剂：3%磺基水杨酸：1.5g定容到50ml； 2.5%酸性茚三酮（4℃下2到3天有效）：冰乙酸：6mol/LH3PO4=3：2 例：1.25g溶到30ml冰乙酸和20ml6mol/LH3PO4中。 6mol/LH3PO4 16ml H3PO4溶到50ml水中 脯氨酸标准溶液：称取25mg脯氨酸，蒸馏水定容到250ml，其浓度为100μg/ml,再取此液10ml用水稀释至100ml,即为10μg/ml的脯氨酸标准液。
二 标准曲线的制作： 1，取7支具塞刻度试管，按下表加入各试剂，混匀后加玻璃球塞，在沸水中加热 40分钟； 2，取出冷却后向各管加入5ml甲苯充分震荡，以萃取红色物质，静置待分层后，吸取甲苯层以“0”管为对照在波长520nm下比色； 3，以消光度为纵坐标，脯氨酸含量为横坐标，绘制标准曲线，求线性回归方程。管号 0 1 2 3 4 5 6标准脯氨酸量（ml） 0 0.2 0.4 0.8 1.2 1.6 2.0H2O 2 1.8 1.6 1.2 0.8 0.4 0冰乙酸（ml） 2 2 2 2 2 2 2酸性茚三酮（ml) 3 3 3 3 3 3 3脯氨酸含量（μg） 0 2 4 8 12 16 20
三 样品测定：1，脯氨酸提取：取混匀剪碎叶片0.2到0.5g，分别置于大试管中，加入5ml 3%磺基水杨酸，加盖，沸水浴中浸提10分钟；2，取出试管待冷却至室温后，吸取2ml上清液，加2ml冰乙酸和3ml 2.5%酸性茚三酮，于沸水浴中加热40分钟，接着按标准曲线制作方法进行甲苯萃取和比色。
四 计算：脯氨酸（μg/g）=XV/(W*A)X——待提取液中脯氨酸含量（μg），由标准曲线求得；V——提取液总体积（ml）；W——样品重（g）；A——测量时吸取的体积（ml）