同微核实验。微核在有丝分裂后期滞留在细胞核外的遗传物质染色体畸变只能在细胞分裂中期相进行观察4小鼠骨髓多染红细胞微核实验
工具/原料
1
实验动物、器材：注射器，离心机，冰冻玻片，试管，显微镜
2
试剂：CP（环磷酰胺），秋水仙碱，PBS（pH6.8），0.075M KCl，Giemsa染液
方法/步骤
1
1.染毒：CP（环磷酰胺）腹腔注射（100mg/kg）一次
2
2.细胞周期同步化：处死前2-3小时腹腔注射秋水仙碱400mg/L，4mg/kg
3
3.取样：双侧股骨→PBS（pH6.8）5ml冲洗骨髓腔→离心1500rpm/min离心十分钟→弃上清
4
4.低渗：0.075M KCl6ml,37°c孵育15分钟→加入固定液1ml预固定1分钟→离心1000rpm/min十分钟，弃上清
5
5.固定：固定液4ml，37°c孵育20分钟→离心十分钟（1000rpm/min），弃上清。重复一次步骤5.
6
6.制片：试管内余下约0.5ml，冰冻玻片滴片，干燥。
7
7.染色：使用Giemsa染液染色3分钟。
8
8.阅片：油镜下计数100个中期相细胞，畸变细胞率
注意事项
1
1.骨骺端，不要取错了地方
2
2.滴片：距玻片5-8cm。过低染色体分散不开，过高细胞破裂
3
3.低渗：时间过长染色体短胖，不清楚；时间过短染色体不分开。
4
如果觉得经验有用，烦请点击下方按钮投上一票，在此万谢
上一篇：csgo小白鼠皮肤怎么得
下一篇：小鼠脑神经元原代培养经验