1.2.2 开机接通电源,依次开启B泵、A泵、检测器,待泵和检测器自检结束后,打开电脑显示器、主机,最后打开色谱工作站CS-Light Real Time Analysis实时分析软件。
1.2.3 排管路气泡1.2.3.1 逆时针转动A/B泵的排液阀180°,打开排液阀。1.2.3.2按A/B泵的[purge]键,pump指示灯亮,泵大约以9.9ml/min的流速冲洗,3min后自动停止。1.2.3.3将排液阀顺时针旋转到底,关闭排液阀。
1.2.4 参数设定1.2.4.1 波长,配备UV-VIS检测器,需设定检测波长,一般设置紫外最大吸收波长为检测波长,通常选择波长为254nm。1.2.4.2 流速,流速设置范围为0.8-1.2mL/min,通常设置为1.0mL/min。1.2.4.3 流动相配比,根据分析样品的性质确定流动相配比。
1.2.5 平衡系统同时启动A、B泵,pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积的流动相。通常平衡20min左右。观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min,噪声为<0.001mV时,可认为系统已达到平衡状态,可以进样。
1.2.6 进样1.2.6.1 点击“单次分析”,进入准备分析状态;点击“样品记录”,输入样品信息;点击“开始”后,仪器准备就绪。1.2.6.2 洗针:用甲醇清洗手动进样器;用试样溶液清洗手动进样器,并排除气泡后抽取适量,约50µL(样品定量环20µL)。1.2.6.3 进样:进样前按检测器[zero]键调零,于手动进样阀进样50µL左右。1.2.6.4 分析结束:出峰结束5-10min后,可手动停止或按设定停止时间自动停止分析。
1.2.7 分析数据:双击CS-Light Postrum Analysis打开数据处理软件,在“数据资源管理器”中找到分析数据,进行处理,调节半峰宽=3sec,斜率=1000uv/min。
1.2.8 出具报告:按照固有的报告格式,出具液相色谱检测报告。
1.2.9 关机:分析结束后,将色谱柱及仪器管路用V甲醇:V水=80:20冲洗半小时以上,退出软件,关CBM、检测器,关主、从泵及电脑。