简单简述细胞培养过程
工具/原料
DMEM培养基,胰蛋白酶,PBS,吸管,细胞瓶等
方法/步骤
1
显微镜观察细胞密度,达到90%即可以传代。
2
先弃去培养瓶中的培养基,并用PBS洗涤一次。
3
加入2ml胰蛋白酶消化细胞30秒,弃去,再干消化1-3min。
4
显微镜下观察细胞消化程度,成单个细胞时,加5ml DMEM培养基吹打细胞。
5
根据要求进行细胞分瓶。一般情况下可以进行1:3-1:10传代。
6
细胞瓶放入CO2培养箱中继续培养。注意瓶盖不要拧太紧。
注意事项
1
注意无菌操作
2
当细胞瓶面积增大时,更要注意不要将瓶盖拧太紧,因为会鼓气,到时候中间位置就没有细胞了
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