环状沉淀实验是Ascoli于1902年建立的,其方法是:先将抗血清加入内径1.5~2mm的小玻管中,约1/3高度,在用细长的滴管沿管壁滴加抗原溶液。抗血清蛋白浓度高,比重较抗原大,所以会分层。室温十分钟至数小时,会出现白色环状沉淀,侧为阳性。主要用于鉴定微量抗原
工具/原料
可溶性抗原 抗体 生理盐水 载玻片 小试管 移液管 玻璃毛细管 不锈钢吸管
方法/步骤
1
1:25 的抗原液体 用生理盐水以对倍稀释法稀释成1:50、1:100、1:200、1:400、1:800、1:1600、1:3200的抗原溶液
2
取九只试管 ,每只加入1/2的抗体溶液0.5ML
3
1至7管加入稀释后的抗原溶液,按梯度加入试管内,缓慢加入,切勿摇晃是界面消失。第八管加入生理盐水 ,第九管加入抗体
4
静置15至30分钟。具体时间以自己实际操作情况为参考。观察是否有白色环状沉淀物。有的即为阳性'+'否则阴性“-”
注意事项
加入抗原时一定要沿着管壁加入,切勿摇晃