WB实验是分子生物学研究中的重要检测手段之一。做好WB实验需要对每一步过程都保持严谨的实验态度。
工具/原料
1
SDS-PAGE凝胶
2
电泳/转膜系统
3
PVDF膜
4
特定抗体
5
常规试剂、缓冲液、发光液
方法/步骤
1
待测样品电泳
2
通过湿转法/半干转法将凝胶上的蛋白通过电流作用转印到PVDF膜上
3
封闭液封闭PVDF膜2h
4
稀释好的一抗孵育1h
5
PBST溶液洗涤PVDF膜5次
6
稀释好的二抗孵育1h
7
PBST溶液洗涤PVDF膜5次
8
发光液显色，曝光仪拍照
注意事项
1
XX生物提示各位需要做WB实验的初学者朋友，孵育时间和温度相关性非常大
2
XX生物提示各位需要做WB实验的老手朋友：每种一抗的特性不同，需要特别注意区分
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