首先，浸染液的制备，在转化前一天将农杆菌接种于加利福平(30 mg/L)、卡那霉素(70 mg/L)和四环素(6.5mg/L)的LB液体培养基中，28C 下，以2 00 r/min的转速，振荡培养过夜，至对数生长期。4C，以6000 r/min 的转速离心10min，收集菌体，用5 %的蔗糖溶液( 含0.05% Silwet L.77) 重新悬浮，至A=0.6~0.8，用作浸染液。
然后，浸染拟南芥花序，将拟南芥倒扣于盛有浸染液的容器上方，使整个花序浸泡于浸染液中用109.6(m/V)蔗糖作对照，轻轻摇晃约10 min。将经过浸泡处理的植株用塑料薄膜罩盖保湿，连同培养容器横放，温室避光培养过夜。
然后，在次日，移去透明塑料罩，将拟南芥植株直立放置，将水浇透。置于光照处22~25C条件下使其正常生长。
然后，经2~~3 周养护，拟南芥开始开花结果。当第一个果荚成熟变黄时,用纸袋套住，当纸袋内的所有果荚变黄后，停止浇水,1~2 周干燥后收获种子,干燥条件下保存，准备转化种子筛选。
然后，将收获的转基因拟南芥种子进行常规消毒: 在超净工作台中置于70%(V/V)乙醇中1min，1%NaCIO溶液中15 min，无菌水洗5~6 次，每次2 min。消毒好的种子撒播在含卡那霉素50mg/L的MS培养基中，置于22~25C光照培养箱中，进行初步筛选，能正常萌发的抗性植株有可能是转化植株。
最后，转化植株的鉴定，鉴定农杆菌转化植株的方法很多，由于PBI 121上带有GUS 基因，可以利用GUS染色的方法鉴定，也可采用PCR法。由于PCR扩增检测操作简便、可靠，该法首先提取抗性植株的基因组DNA，根据目的基因设计的引物进行PCR扩增，扩增出目的带的即为转化子。
上述方法为小编整理所得，希望能够帮助到大家。