随着葡萄酒市场的迅速崛起,葡萄酒种类也层出不穷,然而当我们多品尝几种之后就会发现我国的葡萄酒口味趋同化,这是因为我国葡萄酒企业大多数采用国外固定的几种进口酿酒酵母,不仅增加生产成本,且生产的葡萄酒也不具有独特的风味,因此分离筛选本土酿酒酵母是大势所趋。
工具/原料
1
移液枪、灭菌锅、超净工作台、恒温培养箱等
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YEPD培养基(g/L):葡萄糖20.0,蛋白胨20.0,氯霉素0.2,琼脂40.0,酵母膏10.0;
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WL培养基(g/L):葡萄糖50.0,胰蛋白胨5.0,酵母粉5.0,KH2PO4 0.55,KCl 0.425,CaCl2 0.125,MgSO4 0.125,MnSO4 0.0025,FeCl3 0.0025,溴甲酚绿0.022,琼脂17.0;
方法/步骤
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菌种的分离纯化 冰葡萄汁进行10倍梯度稀释后取0.1 mL涂布于YEPD平板培养基上,28℃恒温培养3 d,得到单菌落,分别挑取不同形态的单菌落再次划线接种于YEPD培养基中, 28℃恒温培养培养3 d,将得到的酵母菌单菌落接种于YEPD培养基斜面,28℃恒温培养3 d,然后放于-4℃冰箱中保存。
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菌种的形态鉴定 将分离纯化得到的酵母菌平板划线接种于WL鉴别培养基,28℃恒温培养5-7 d,观察培养基中菌落的特征。根据菌落的颜色形态判断酵母菌的种属。酿酒酵母在WL鉴别培养基上的颜色为奶油色带绿色、不透明,形状为球形、光滑、突起。如下图所示:
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