ELISA实验的过程中的注意事项

所有的操作过程一般都用排枪处理，在操作过程中，排枪吸两档打一档，会防止气泡的产生，并且操作时一定要保证枪头每步都要插紧，选择配套的枪头尤为重要，枪头容易掉，影响实验效果，此外每一步都要看好枪头的页面要平齐，避免枪头松动自己却不知。

在处理稀释标准品的过程中，要在涡旋仪上点一下，使混匀，但振荡过程不宜过长，防止出现蛋白质降解变性的现象

二抗的稀释浓度对显色效果起着至关重要的作用，每次选用新的二抗或在-80度冰箱拿分装好的二抗最好是每一次都做一个预实验，设置不同的二抗浓度和显色时间，从而确定相应的条件，方可做好大规模的筛选细胞工作。

同种细胞株的ELISA孵育时间要保持一致，降低无关变量的影响。

各种抗体的保存最好是在-80度冰箱，一定要将降低冻融次数，蛋白比较敏感，冻融次数多，蛋白活性就会降低。

稀释样品时一定要保证混匀，枪尖在液面以下吹打相同的次数，可防止出现气泡。

分析数据的过程中，一般至少要5个点，不然数据没有相应的说服力。

96孔板取完样品后，盖好，提早加好DPBS稀释液，防止时间过长，样品挥发，浓度不准。