为什么不推荐使用淀粉酶探究pH对酶活性影响

（1）不同的淀粉酶反应的最适温度不同。唾液淀粉酶、胰淀粉酶为37℃，但工业用细菌α-淀粉酶最适温度为60℃。（2）淀粉与碘的蓝色反应在pH=3~5的弱酸性环境下进行最灵敏，59时不显色（或一开始显蓝色，后不显色）。这是由于碘会与调节pH所用的NaOH反应，产生次碘化钠（NaIO）和碘化钠（NaI），使之丧失作为检测试剂的功用。（3）利用碘液来检测pH对淀粉酶活性的影响实验的实验现象：淀粉加入5% HCl后加入淀粉酶，经60℃保温反应，加入碘液后，呈现棕红色。在重复实验后发现甚至会呈现出红色、褐色，且与滴加淀粉酶的时间有关（即淀粉于HCl中存留时间有关）。这是由于淀粉及其水解产物都能与碘液发生反应，原理是碘分子嵌入淀粉螺旋体中，形成络合物。淀粉与碘生成的络合物的颜色与淀粉的聚合度或分子质量有关：一般来说①>60个葡萄糖单位时，显蓝色；②20个葡萄糖单位时，显红色；③<6个葡萄糖单位时，不能形成螺旋体，不显色。且淀粉在酸性条件下加热，也会发生自然水解，因此，上述实验中淀粉在HCl中存留的时间不同，显色也不一样。即使在强酸环境下，淀粉酶失活，淀粉也可能不与碘产生蓝色反应，而呈现出红色、褐色等，不能准确检测淀粉酶于该pH值下是否失活。（4）那么我们是否就能用斐林试剂作为检测试剂呢？答案也是否定的。斐林试剂的Cu（OH）2可与HCl产生中和作用，使斐林试剂失去鉴定作用。即使在酸性条件下淀粉酶具活性，使淀粉水解成还原糖，也检测不出来。若利用磷酸盐-柠檬酸盐缓冲液调节pH值，以唾液淀粉酶作实验材料，实验误差可能会减少。（5）综上所述，用淀粉酶来做pH对酶活性影响的检测实验需要考虑的因素太多，最好的方法还是改变反应底物与酶，用过氧化氢酶催化过氧化氢的分解来完成此实验，这样就能回避选择试剂中需要考虑的种种复杂问题。以上资料都是来自于理论，而实际操作是否会产生这些问题还有待于验证。2、若用淀粉蔗糖淀粉酶来探究酶的专一性,为何不可选用碘液对实验结果进行检测？应该是利用淀粉、蔗糖、淀粉酶和斐林试剂验证酶的专一性，不能用碘液。如果用碘液的话，蔗糖遇碘不变色，淀粉如果完全被淀粉酶催化水解了照样不会使碘液变蓝。所以这个实验要用斐林试剂检测。再者：这个实验的目的是要探究是否有淀粉被分解，而不是探究淀粉是否被完全分解。所以只要检测分解产物是否存在就够了。3、探究温度对淀粉酶活性的影响，不能选择斐林试剂对结果进行检测。斐林试剂检测时需要水浴加热，这时就会改变体系温度，导致酶活性改变，造成检测结果不准确。应选用碘液。