CFSE能够轻易穿透细胞膜,在活细胞内聚积并与胞内蛋白共价结合,水解后的CFSE释放出荧光物质,这些共价结合的荧光物分子很少从细胞内脱落。CFSE标记后的细胞用于体内观察可以长达数周。因此,CFSE常被用来做活细胞检测试验和用荧光电镜观察细胞长期活动的试验。CFSE标记的细胞的激发和发射波长分别为500 nm和520 nm。
方法/步骤
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1. 用DMSO制备1mM 的CFSE溶液。用PBS或适当的缓冲液将其稀释成10-50 μM的CFSE溶液。
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2. 将1/10细胞培养基体积的CFSE溶液加入到细胞培养基中。
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3. 在37℃培养细胞15-30分钟。
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4. 用PBS或适当的缓冲液洗涤细胞两次。
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5. 用490 nm激发波长,530 nm发射波长的滤光片的荧光显微镜观察细胞。
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