最近小编收到很多问题，其中一个就是下面小编为大家整理一下关于毕赤酵母电转化法感受态细胞的制备步骤的步骤，希望这些方法能够帮助到大家。
方法/步骤
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首先，在YPD平板上划线毕赤酵母X33菌株，在28-30摄氏度培养两天，以得到分散的单菌落。
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然后，挑取酵母单菌落，接种至含有10mlYPD培养基的100ml三角瓶中，在30摄氏度250-300r/min培养过夜至饱和。
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然后，取300微升的培养物接种至含有150ml新鲜YPD培养基的500ml三角摇瓶中，在28-30摄氏度205-300r/min培养过夜，约十小时至OD600达到1.3-1.5.
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然后，将细胞培养物于4摄氏度1500g离心五分钟，弃上清液，用150ml预冷的无菌水悬浮菌体沉淀。
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然后，在4摄氏度1500g离心五分钟，弃上清液后用75ml的冰预冷的无菌水将菌体沉淀重悬。
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然后，在在4摄氏度1500g离心五分钟，弃上清液后用10ml的冰预冷的1mol/l的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬。
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最后，在4摄氏度1500g离心五分钟，弃上清液后用300微升的冰预冷的1mol/l的山梨醇溶液将菌体沉淀重悬，其终体积约为500微升，移至0.5ml的离心管中，进行冰浴待转化。
注意事项
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上述方法为小编整理所得，希望能够帮助到大家。
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上述图片来源于网络，可能与方法不符。
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